Irene Dalfen, Ruslan I. Dmitriev, Gerhard Holst, Ingo Klimant, Sergey M. Borisov

Anal. Chem. 2019, 91, 1, 808–816

Publication Date:December 6, 2018

DOI: https://doi.org/10.1021/acs.analchem.8b02534

圖文節(jié)選（1）

圖5:D4（1 % wt）中基于PhOHCl₂-DAOTA的平面光電極pH的FLIM成像。（a） ：顯微成像實(shí)驗(yàn)中獲得的熒光壽命的pH依賴性（讀出區(qū)～ 0.9 x 0.9毫米）。金屬箔已在室溫下測(cè)量≥ 每個(gè)pH值有3個(gè)不同的點(diǎn)。（b） ：帶有集成傳感器箔的微流控芯片的照片圖像。（c） 和（d）：使用pH 6.5和5.0的緩沖液（速度21 μL min^-1）同時(shí)沖洗的微流控芯片的衰變時(shí)間和pH分布的偽彩圖像

圖文節(jié)選（2）

使用PCO（www.pco.de）的pco.flim相機(jī)在頻域內(nèi)進(jìn)行成像實(shí)驗(yàn)。激發(fā)源Omicron（www.Omicron-laser.de）的488 nm激光二極管（PhoxXplus 488-200用于pco.flim），以15 MHz調(diào)制頻率（方波調(diào)制）進(jìn)行調(diào)制。平均激光功率為100 mw。Nikon的NIS Elements AR顯微鏡軟件用于數(shù)據(jù)采集和處理。對(duì)于顯微鏡測(cè)量，從傳感器箔上切下直徑為5 mm的傳感面積，并將其粘在Greiner bio one（www.gbo.com）的一個(gè)黑色96微孔板上。使用配備尼康Plan Apo 20x/0.75物鏡和安裝在相機(jī)上的0.7x相機(jī)適配器的尼康Eclipse Ti-S顯微鏡獲取圖像。濾塊兒包括一個(gè)激發(fā)帶通濾波器FF02-482/18、一個(gè)二向色鏡Di02-R488和一個(gè)發(fā)射長(zhǎng)通濾波器BLP01-488R，均來(lái)自Semrock（www.Semrock.com）。使用Starna Scientific（www.Starna.com）的染料摻雜樣片UMM/SFG作為壽命標(biāo)準(zhǔn)（τ=3.75 ns）……為了證明傳感器的實(shí)際適用性，我們使用一種新的頻域壽命成像相機(jī)pco.flim對(duì)其進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)調(diào)查。在成像實(shí)驗(yàn)（圖5a）和TCSPC（圖4）中獲得的熒光衰減時(shí)間的pH依賴性相似。放置在微流控芯片（圖5b）腔室中的平面光電極被證明非常適合監(jiān)測(cè)pH梯度（圖5c和5d）。這可能有用，例如，用于監(jiān)測(cè)酶反應(yīng)和等電聚焦。該實(shí)驗(yàn)還表明，平面光電極與FD-FLIM相機(jī)結(jié)合也可用于宏觀上的其他實(shí)驗(yàn)，例如監(jiān)測(cè)生物膜或傷口愈合期間的pH值。

關(guān)于pco.flim

pco.flim相機(jī)系統(tǒng)是第一種采用Two-Tap CMOS成像芯片的熒光壽命成像相機(jī)。相機(jī)的像素和激發(fā)光間的同步使100皮秒至100微秒間的熒光衰減時(shí)間的分析成為可能。在1008 x 1008像素分辨率上，pco.flim最多可以讀取45個(gè)雙幀/秒，且可支持5 kHz – 40 MHz頻率范圍的調(diào)制。

基本參數(shù)：

• pco.flim激光器作為落射熒光測(cè)量的光源

• 可選擇的激光波長(zhǎng)和輸出功率

• 100 ps到100 μs的壽命測(cè)量

• 調(diào)制頻率從5千赫茲到40兆赫

• 500千赫茲到40兆赫外部調(diào)制信號(hào)

• 正弦/矩形的調(diào)制信號(hào)波形

• 像素分辨率1008 x 1008

• 頻域FLIM

• USB 3.0接口

• 量子效率39 %

• 動(dòng)態(tài)范圍1000:1

• 45 雙幀/秒 (2 tap讀出)

• 可選曝光時(shí)間為1 ms到2 s

• 無(wú)振動(dòng)水冷

• 特殊的測(cè)量與分析軟件

  
  

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【關(guān)于PCO】

PCO的字義正是基于我們的角色：Pioneer in Cameras and Optoelectronics – 相機(jī)和光電技術(shù)的先鋒。

經(jīng)過(guò)30年專業(yè)知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)的積累，PCO已被打造成科研和工業(yè)應(yīng)用領(lǐng)域中數(shù)碼相機(jī)的前沿專家和創(chuàng)新者，其產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、物理科學(xué)、高速成像和機(jī)器視覺(jué)。

我們擁有市場(chǎng)上最豐富的sCMOS相機(jī)序列，具有全球認(rèn)可的開(kāi)發(fā)各種技術(shù)領(lǐng)先、性能優(yōu)良、型號(hào)廣泛的相機(jī)系統(tǒng)的實(shí)力。我們?cè)谑澜绺鞯氐臋C(jī)構(gòu)和伙伴保證PCO相機(jī)的研制和支持能夠滿足用戶的應(yīng)用。我們的產(chǎn)品研制和支持團(tuán)隊(duì)可以直接采納用戶意見(jiàn)。我們?cè)诋a(chǎn)品硬件和軟件上的不斷前進(jìn)，支撐了我們強(qiáng)大的創(chuàng)新力量和競(jìng)爭(zhēng)實(shí)力。

【關(guān)于Excelitas Technologies Corp.】

Excelitas Technologies Corp.是科技領(lǐng)域的領(lǐng)導(dǎo)者，提供高性能、市場(chǎng)驅(qū)動(dòng)的光子創(chuàng)新產(chǎn)品，滿足全球客戶對(duì)照明、光電、探測(cè)和光學(xué)技術(shù)的需求。Excelitas Technologies Corp.服務(wù)于汽車、消費(fèi)品、國(guó)防和航空航天、工業(yè)、醫(yī)療、安全和安防以及科研領(lǐng)域的眾多應(yīng)用，致力于促進(jìn)客戶取得成功。我們的團(tuán)隊(duì)由 7,000 名專業(yè)人員組成，他們?cè)诒泵?、歐洲和亞洲工作，為全球客戶提供服務(wù)。